BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)
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| 商品名称 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) |
|---|---|
| 品牌 | 碧云天Beyotime |
| 商品编号 | P2233 |
| 保存条件 | 4ºC保存，至少一年有效。 |
| 注意事项 | 注意事项： 请勿在-20ºC或更低温度冷冻保存本产品。 本产品使用过程中，缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM，SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%，Triton X-100、Tween-20、NP-40的浓度不宜超过2%，脱氧胆酸钠、CHAPS的浓度不宜超过1%，组氨酸浓度不宜超过20mM，钙离 子浓度不宜超过5mM，钠离子和镁离子浓度可以高达2M，盐酸胍浓度可以高达6M，尿素浓度可以高达8M，甘油浓度可以 高达50%。本产品不能耐受还原剂、螯合剂和强酸强碱。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂，但还有待实验验证。 碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail: order@beyotime.com 技术咨询: info@beyotime.com 碧云天网站 微信公众号 网址: http://www.beyotime.com 保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。 碧云天有多种不同容量的亲和层析柱空柱管(FCL01/FCL03/FCL06/FCL12/FCL30/FCL60)，可以和本产品配合使用。 若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物，可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。 蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4ºC或冰浴，以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解，可以在裂解液 中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的P1030/P1031 蛋白酶抑制剂混合物(His-Tag蛋白纯化用, 100X)。 若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果，可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度和(或)pH，以达到最优效果。 如果目的蛋白纯化必须使用螯合剂或还原剂，推荐使用碧云天生产的 P2210/P2218/P2220 BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型)。 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 产品简介 | 碧云天生产的BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)，即BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Denaturantresistant)，是一种耐变性剂型的His标签蛋白纯化介质，俗称镍柱。本产品是一种新型的可以兼容尿素和盐酸胍等强蛋白变 性剂，从而不仅可以在非变性条件下也可以在变性条件下简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的纯化介质。 通常带有6个组氨酸标签的重组蛋白(6xHis-tagged recombinant protein)或带有6个以上连续组氨酸标签的重组蛋白，被称为His 标签蛋白。蛋白样品溶液通过BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)时，重组蛋白His标签上的组氨酸残基能特 异性地结合到BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)中的镍离子上，其它蛋白则不能被结合。洗涤后，His标签 重组蛋白可在非变性条件下或者变性条件下被洗脱，从而被分离纯化。 本产品对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大，使用本产品可以获得高纯度的His标签重组蛋白，可用于简 单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以 用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。 本产品采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Beyorose™ CL-6B，与Sepharose CL-6B性能基本一致)为基质，并使用了进一 步优化的接臂和镍离子螯合技术，和目前市售的同类产品相比，非特异性蛋白结合显著降低。 本产品可以耐受8M尿素或6M盐酸胍，可用于非变形条件和变性条件下His标签蛋白的纯化。DTT、β-巯基乙醇等还原剂会 还原螯合结合的镍离子，而EDTA/EGTA等二价离子强螯合剂则会使本产品脱镍，因此在蛋白样品或者纯化过程所使用的溶 液中不能含有还原剂和螯合剂。如需在强还原剂如DTT/β-巯基乙醇或螯合剂EDTA/EGTA存在的条件下纯化蛋白，推荐使用 碧云天的耐受还原剂和螯合剂的P2210/P2218/P2220 BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型)。 本产品已经螯合了镍离子，呈蓝绿色，凝胶的颗粒直径为45-165μm。可耐受的最大压力为0.025MPa，约合5.8psi。采用固定 流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5ml/min。 本产品可以高容量、高特异性地结合His标签蛋白。最大蛋白结合量约为25-35mg蛋白(分子量为55kD的蛋白)/毫升凝胶。实 际使用时的最大结合量主要取决于待纯化的His标签重组蛋白的分子量大小，分子量越大则最大结合容量越大，分子量越小 则最大结合容量越小。但对于分子量相同的蛋白，也会因为蛋白本身特性的不同，结合的最大容量也会有所不同。 本产品储存在20%乙醇中。本产品包装体积中50%为凝胶，例如10ml总体积中5ml为凝胶，5ml为液体。使用时宜把凝胶充分 重悬后再吸取。 每10ml包装的本产品最多可纯化100-200mg带有His标签的重组蛋白(分子量为55kD的蛋白)，分子量更大的蛋白结合容量会 更大一些。 |
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