RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式)
综合评分
- 商品
5分 - 服务
5分 - 物流
5分
热销商品排行
| 产品名称 | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) |
|---|---|
| 品牌 | 碧云天Beyotime |
| 货号 | R0091S |
碧云天的RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式)，即RNAeasy™ Blood RNA Isolation Kit with Spin Column，是一种基于离心柱法从血液中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提长度大于200个核苷酸(Nucleotide, nt)的RNA的试剂盒。抽提获得的大于200个核苷酸的RNA (也常被称为总RNA)可以用于各种常规用途。
本试剂盒抽提得到的RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验；也可用于基因表达芯片分析(Microarray)、高通量测序(High throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
RNA按照长度可以分为长链RNA (Long RNA)和小RNA (Small RNA)，长链RNA通常大于200nt，而小RNA通常小于200nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA (Long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA (Ribosomal RNA)、5S rRNA、tRNA (Transfer RNA)、microRNA (miRNA)、siRNA (Small interfering RNA)、piRNA (Piwi-associated small RNA)、tsRNA (tRNA-derived small RNA)、srRNA (Small rDNA-derived RNA)等[1]。
本试剂盒抽提RNA的基本流程如图1所示。样品在裂解液中迅速裂解，释放出总RNA，然后让RNA特异性地结合到纯化柱上，而基因组DNA和蛋白质等其它组分通过高速离心被有效去除，再通过3次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质，最后用洗脱液将高纯度的RNA洗脱下来。
图1.碧云天RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0091) RNA抽提流程示意图。
本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的柱纯化介质进行RNA分离纯化，能有效避免传统的TRIzol LS法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂。
本试剂盒使用快速、便捷。本试剂盒无需使用红细胞裂解液去除无核的红细胞，避免RNA降解；采用柱纯化，无需繁琐的RNA沉淀步骤，抽提操作过程仅15-20分钟。相比于传统的TRIzol LS抽提法，本试剂盒的操作流程显著简化，缩短了抽提时间，降低了RNA被降解的风险。和国外同类柱纯化产品相比，所需操作步骤和操作时间基本一致。
本试剂盒抽提得到的RNA得率高、纯度高。纯的RNA其A260/A280约为2.0，但在很多仪器上测定时会高于2.0，低于1.9通常认为有蛋白、DNA或者酚等的污染；纯的RNA其A260/A230约为2.0左右或者略高，低于1.9通常认为有碳水化合物、胍盐、多肽或酚等的污染。本试剂盒效果经反复测试，抽提得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2，A260/A230通常为1.9-2.1。本产品对于小鼠血液样品的抽提效果如图2所示。
图2.碧云天RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0091)对小鼠血液样品的抽提效果。小鼠全血新鲜样品(ctrl)和用
RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)
分别在4℃保存30天、室温保存7天以及37℃保存1天后，使用本产品抽提RNA，随后取相同体积的RNA样品进行电泳。电泳条件为：RNA样品变性处理后，在含6.67%甲醛和适量NA-Red (D0128)
的1%变性琼脂糖凝胶中进行电泳检测。实测效果可能有所不同，本图仅供参考。本产品适用于纯化200nt以上的RNA，对小于200nt的small RNA即小RNA (如5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、miRNA、piRNA等)被选择性地去除，如果希望抽提得到小于200nt的小RNA，推荐使用碧云天的
BeyoMag™磁珠法血液RNA提取试剂盒(R0093)
。本试剂盒适用于新鲜、冻存、经EDTA、肝素等抗凝处理或经过
RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)
保存的血液RNA的抽提，推荐的血液样品量为200μl。本试剂盒小、中和大包装可分别用于12、50和200个样品的RNA抽提。包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0091S-1 | 裂解液 | 8ml |
| R0091S-2 | 结合液 | 8ml |
| R0091S-3 | 洗涤液I | 8ml |
| R0091S-4 | 洗涤液II | 15ml |
| R0091S-5 | 洗脱液 | 1.2ml |
| R0091S-6 | RNA纯化柱及废液收集管 | 12套 |
| R0091S-7 | RNA洗脱管 | 12个 |
| － | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0091M-1 | 裂解液 | 32ml |
| R0091M-2 | 结合液 | 32ml |
| R0091M-3 | 洗涤液I | 32ml |
| R0091M-4 | 洗涤液II | 63ml |
| R0091M-5 | 洗脱液 | 5ml |
| R0091M-6 | RNA纯化柱及废液收集管 | 50套 |
| R0091M-7 | RNA洗脱管 | 50个 |
| － | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0091L-1 | 裂解液 | 125ml |
| R0091L-2 | 结合液 | 125ml |
| R0091L-3 | 洗涤液I | 125ml |
| R0091L-4 | 洗涤液II | 125ml×2 |
| R0091L-5 | 洗脱液 | 15ml |
| R0091L-6 | RNA纯化柱及废液收集管 | 200套 |
| R0091L-7 | RNA洗脱管 | 200个 |
| － | 说明书 | 1份 |
室温保存，一年有效。
注意事项：血液样品推荐使用
RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)
进行保存以保持RNA的完整性。通过本试剂盒抽提得到的RNA已经去除绝大多数DNA，通常情况无需DNase处理。后续如进行某些对DNA残留较敏感的实验时，可以在使用说明中步骤4离心后，在纯化柱中加入适量DNase I进行消化，具体请参考使用说明。
本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free，操作时应小心，避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话，以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。
对于操作环境中RNA酶的去除，推荐使用碧云天生产的
RNase and DNase Away (R0123)
以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
结合液、洗涤液中含有乙醇，使用后须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.按照1:3的比例在血液样品中加入裂解液，例如200µl的血液样品中加入600µl的裂解液，轻轻吹打5-10次。
注：保存在
RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)
中的血液样品，请参考RNALater™血液RNA稳定保存液的使用说明步骤1、2对血液样品进行处理。2.加入等体积结合液至裂解液中，轻轻颠倒混匀3-5次。此时可能会有沉淀物产生，属于正常现象。
3.将混合物(包括沉淀物)转移至纯化柱内，12,000×g离心30秒，倒弃收集管内液体。
注：当裂解液的体积大于300µl时，在加入等体积结合液后，总体积会超过纯化柱的容量，这时应分成2次过柱，即将一半的混合物过柱后，再将剩余的混合物重复步骤3一次。
4.加入600µl洗涤液I，12,000×g离心30秒，倒弃收集管内液体。选做：通过本试剂盒抽提得到的RNA已经去除绝大多数DNA，通常情况无需DNase处理。后续如进行某些对DNA残留较敏感的实验时，可在本步骤离心后，在纯化柱中加入80µl含10U DNase I的酶溶液(推荐使用碧云天RNase-free的
DNase I，D7073
或D7076
，每80µl酶溶液按照71.8µl水加8µl 10X Reaction Buffer再加0.2µl 50U/μl DNase I混合配制而成)，室温放置消化15分钟。消化结束后，不需要进行离心等任何额外的操作，直接进入步骤5。5.加入600µl洗涤液II，12,000×g离心30秒，倒弃收集管内液体。
6.重复步骤5一次。
7.最高速(约14,000-16,000×g)离心2分钟，去除残留的液体。
8.将RNA纯化柱置于本试剂盒提供的RNA洗脱管中，加入30-50µl洗脱液，室温放置2-3分钟，最高速离心30秒，所得溶液即为纯化的RNA。本试剂盒抽提得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2，A260/A230通常为1.9-2.1。
注：洗脱液需要加到纯化柱柱面中央，使其被完全吸收。如需获得更高浓度的样品，可把洗脱液的体积减小至20µl，但洗脱下来的RNA量会相对减少。室温较低时，洗脱液在37℃预热片刻对得率有所帮助。此外，洗脱后的溶液再次加回到原纯化柱再离心洗脱一次，可提高得率约10-30%；或者在第一次洗脱后使用新的洗脱液再洗脱一次，会获得约为第一次洗脱量15-40%的RNA。
参考文献：
1.Joyce GF. Nature. 2002. 418(6894):214-21.
相关产品：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0011 | Beyozol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
| R0016 | Trizol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
| R0021 | DEPC水(DNase、RNase free) | 100ml |
| R0022 | DEPC水(DNase、RNase free) | 500ml |
| R0024 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
| R0026 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
| R0027 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
| R0035S | RNAeasy™病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
| R0035M | RNAeasy™病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
| R0035L | RNAeasy™病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
| R0091S | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
| R0091M | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
| R0091L | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
| R0093S | BeyoMag™磁珠法血液RNA提取试剂盒 | 10次 |
| R0093M | BeyoMag™磁珠法血液RNA提取试剂盒 | 50次 |
| R0095S | BeyoMag™磁珠法血液mRNA抽提试剂盒 | 50次 |
| R0095M | BeyoMag™磁珠法血液mRNA抽提试剂盒 | 200次 |
| R0116 | RNALater™血液RNA稳定保存液 | 100ml/500ml |
| R0123 | RNase and DNase Away | 250ml |
| R0125 | RNase, DNase and DNA Away | 250ml |
| R0127 | RNase, DNase, RNA and DNA Away | 250ml |
| ST036 | DEPC | 10g |
售后保障
1.售后服务
幺米Lab自营店铺销售的商品，由平台提供电子发票或纸质发票和相应的售后服务。确保为原厂正货！保证与当时市场上同样主流产品一致。请您放心购买！
入驻店铺销售的商品，由入驻商家提供发票和相应的售后服务。
如您购物环节遇到任何问题，请第一时间联系客服人员，我们会尽心为您处理问题。
2.退换货说明
用户在收到货物后请立即检验产品包裹，若发现任何包装规格、数量、品种不符，外观毁损、短缺或缺陷，请在2个工作日内将能说明相关问题的产品外观照片，反馈给我方客户服务部，我们会第一时间核实具体情况，为您办理退换货。
如果你在使用产品的过程中，遇到产品内在质量的问题，请在7个工作日内，将产品的外观照片，检测数据，测试谱图等能说明产品确实存在质量问题的证据，反馈给我司客服人员，我们会对产品的证据进行核实判断，尽快给出处理结果，如若产品确实存在质量问题，我们会在第一时间为您办理退换货。
若因客户个人原因导致的退换货，须经我方售后客服人员核实确认，在确保产品可以进行二次销售的前提下，我们会为您办理退换货，我们将收取产品成交价的20%的手续费。
详情参见售后说明
3.关于发货
幺米委托第三方快递公司为客户提供送货上门服务，客户无须向快递公司支付额外的费用。
入驻商家发货的订单，如您有特殊需求，可以联系商家协商发货快递。
